價格:3280元
1KIT
貨號:TL-625KIT
人
<2EU/mL
黃色至棕色液體
1. 將人的PBMC細胞重懸于含1% HSA的PBS緩沖液中,取樣計數(shù),取1×10?個細胞至1.5mL Ep管中,1500rpm,離心5min。
2. 棄上清,取80μL MaxSortin?細胞分選緩沖液重懸,加入20μL MaxSortin?CD14分選磁珠,混勻后將其放入2~8℃冰箱孵育15min。
3. 取MaxSortin??L型分離柱放入MACS分選器上,用1mL MaxSortin?細胞分選緩沖液潤洗兩次。
4. 將孵育完成后的樣品從2~8℃冰箱取出,加入1mL MaxSortin?細胞分選緩沖液,1500rpm,5min離心,棄上清。
5. 加入1mL MaxSortin?細胞分選緩沖液重懸,將樣品加入分離柱中,待其自然流出后,分兩次加入 MaxSortin?細胞分選緩沖液,每次加1mL,15mL管收集流出液。
6. 待MaxSortin?細胞分選緩沖液全部流出后,將分離柱從MACS分選器上取下,放到另一新的15mL離心管中,向分離柱中加入3mL MaxSortin?細胞分選緩沖液,用分離柱配套活塞將液體直接打出。
7. 將裝有收集液的15mL離心管放入水平離心機,1500rpm,離心5min。
8. 離心完成后倒掉上清,取1mL 1×DPBS溶液重懸細胞,計數(shù)并進行流式檢測。
1. 磁珠與細胞孵育時需要徹底混勻,以提高分選效率。
2. 該試劑盒配套緩沖液和分離柱可供起始實驗使用,如涉及更多次實驗操作,請另行購買MaxSortin?細胞分選緩沖液(貨號:MS-BF100)及MaxSortin?L型分離柱(貨號:MS-CL01)。
MaxSortin?CD14分選試劑盒可用于富集或者去除分選人PBMC中的單核細胞和巨噬細胞,通過納米級CD14分選磁珠與細胞孵育,實現(xiàn)CD14+細胞的分選。利用MaxSortin?CD14分選磁珠與PBMC孵育并進行磁性分離,使CD14+細胞分離并富集,起到去除或純化CD14+細胞的作用和功能。